Modifikasi Metode Preparasi Pewarnaan Akar untuk Deteksi dan Visualisasi Pembentukan Koloni Fungi Mikoriza Arbuskula (FMA)

Abstrak

Pewarnaan akar bertujuan untuk memperjelas dan mempertajam gambaran FMA yang berasosiasi dengan tumbuhan pada bagian akar sehingga mempermudah dalam pengamatan dengan mikroskop cahaya. Penelitian dilakukan untuk mendapatkan metode preparasi pewarnaan akar yang efektif (cepat, aman, dan ekonomis) dan fleksibel sehingga visualisasi FMA pada akar menjadi jelas dan kontras. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah deskriptif kualitatif yang mencakup kebersihan akar dari isi sel, tekstur akar, dan kekontrasan warna, yang terdiri dari tiga perlakuan yaitu P₁ (kontrol) menggunakan KOH 10% dengan pemanasan 90°C dan diikuti dengan prosedur pewarnaan Philips & Hayman (1970) yang dimodifikasi, P₂ menggunakan KOH 5% dengan pemanasan pada suhu 90°C dilanjutkan dengan prosedur pewarnaan yang dimodifikasi dengan memakai HCl 1%, dan P₃ menggunakan KOH 5% pemanasan pada suhu 90°C kemudian diwarnai mengikuti metode pewarnaan yang dimodifikasi dengan penggunaan cuka komersial (untuk konsumsi) sebagai pengganti HCl. Semua perlakuan menggunakan pewarna Biru Trypan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan P₂ dan P₃ menunjukkan hasil yang tidak berbeda dengan P₁ yakni keadaan akar yang cukup bersih sehingga deteksi dan visualisasi FMA masih dapat diamati dengan baik. Metode perlakuan P₃ dengan pemanasan selama 9 menit dapat menjadi metode alternatif yang efektif (cepat, aman, ekonomis) dan fleksibel; cepat karena waktu yang diperlukan 9 menit untuk pembersihan sel-sel akar, relatif aman dengan penggunaan larutan cuka komersial (vinegar) untuk menggantikan larutan HCl, ekonomis karena dapat menurunkan kebutuhan bahan KOH hingga 50%.